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产品用途:用于食品和临床样本中产气荚膜梭菌的分离培养和计数。
检验原理:胰胨、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;偏亚硫酸氢钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;卵黄含有卵磷脂,可检测某些含卵磷脂酶的梭菌;琼脂是培养基的凝固剂;D-环丝氨酸抑制非梭菌的细菌。
配方成分:
配方(每升) |
含量 |
胰胨 |
15.0g |
大豆胨 |
5.0g |
酵母膏粉 |
5.0g |
焦亚硫酸钠(Na2S2O5) |
1.0g |
柠檬酸铁铵 |
1.0g |
琼脂 |
15.0g |
最终pH 7.6±0.2 |
使用方法:称取本品干粉42g,加入蒸馏水或去离子水1000 mL ,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,每 瓶250 mL ,121℃高压灭菌15 mL。待TSC培养基冷至50℃左右,每100 mL培养基基础加入配套试剂1支,(制作卵黄平板:加50%卵黄乳液10 mL到100 mL培养基中),立即摇匀。倾注无菌平板,备用。
卵黄乳液:用硬刷刷洗鲜蛋,沥干,放70%乙醇中浸泡1h。以无菌操作取出蛋黄,加等体积无菌0.85%氯化钠溶液,混合置4℃贮存。
质量控制:下列质控菌株接种后于35~37℃厌氧培养24h,观察结果如下表:
指标 |
质控菌株及编号 |
标准值 |
特征性反应 |
生长率 |
产气荚膜梭菌 ATCC13124 |
PR≥0.7 |
黑色菌落 |
选择性 |
艰难梭菌 ATCC43592 |
G≤1 |
- |
储存条件与保质期:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;贮存期三年。
注意事项:
1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。
2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。贮存于避光、干燥处。未开封产品保质期三年。开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。
废物处理:检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
参考文献:GB 4789.13-2012 食品安全国家标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验